In Gladiators Online: Death Before Dishonor übernimmt der Spieler die Rolle eines Lanista, oder Gladiatoren-Besitzers, im antiken Rom. Beginnend mit einer kleinen Gladiatorenschule bietet er einfache Unterhaltung für die Menschen an den Grenzen des Imperiums. Dazu trainiert, heilt und stattet er seine Gladiatoren so aus, dass diese in den nächsten Kämpfen eine möglichst große Überlebenschance besitzen. Gladiators Online ist ein Management-Spiel, in dem jedes Detail zählt – Erfolg und Ruhm hängen dabei von den wirtschaftlichen Entscheidungen des Spielers wie dem Glück und Können der Gladiatoren in der Arena ab. In den blutigen Zweikämpfen werden die Kämpfer häufig verwundet oder gar getötet – alles zu Ehren der eigenen Gladiatoren-Schule.

Die Einnahmen aus der Arena wiederum fließen in die Erweiterung der Schule, fachgerechtes Personal und junge Talente vom Sklavenmarkt. Von der Auswahl des Trainings über die spezielle Ausrüstung bis hin zum Anheuern der richtigen Trainer und Kurtisanen, umfasst die Aufgabe des Lanista alle Planungs- und Finanzierungsebenen.

Im Kampf konkurrieren die Spieler mittels reaktionsgesteuerter Events um die Gunst des Publikums, während der eigentliche Kampf selbstablaufend und fair bleibt. Dabei stellt der Matchmaking-Service sicher, dass alle vier Gladiatorenklassen in jedem ihrer zehn Level fair gegeneinander gesetzt werden.

Siegreiche Kämpfer entwickeln sich zu den Champions ihres Hauses, werden von ihren Anhängern verehrt und verhelfen ihrer Schule zu einem Spitzenplatz in der Liga. Mit jedem Aufstieg des eigenen Hauses erschließen sich dem Spieler dabei neue Waffen und Rüstungen, neue Arenen und bessere Mitarbeiter.